Федеральное государственное бюджетное учреждение науки
Цель работы: изучить влияние перфторана на
репаративные процессы в зоне межкишечного анастомоза.
Материалы и методы.
Экспериментальная часть исследования выполнена на 20 беспородных собаках обоего пола весом от 17 до 23 кг. Геморрагический шок воспроизводили однократным массивным выпусканием крови из бедренной артерии в объеме 2,5% от массы тела животного в течение
8-10 минут. Под наркозом выполняли лапаpотомию и накладывали три межкишечных анастомоза "бок в бок", без резекции кишки, на расстоянии 50 сантиметров от связки Трейца - первый анастомоз,
60 сантиметров - второй, 70 сантиметров - третий. Первой группе
(10 собак) после завершения анастомоза внутриартериально струйно вводили перфторан из расчета 6 мл на кг массы тела и физиологический раствор в расчете 10 мл на кг массы тела. Второй группе (10 собак) вводили полиглюкин и физиологический раствор в тех же дозах.
Плановые релапаротомии выполняли на третьи, седьмые и девятые сутки послеоперационного периода. Резецировали один из ранее наложенных анастомозов с восстановлением проходимости кишки анастомозом "конец в конец". Для гистологического исследования область анастомоза иссекали в виде полоски шириной 1,5-2 см и фиксировали в 10% растворе нейтрального забуференного по Лелли формалина. После фиксации из препаратов вырезали участки, которые по общепринятым методикам подвергали проводке, обезвоживанию и заливке в парафиновые блоки. Затем готовили гистологические серийные и ступенчатые срезы толщиной 5-7 мкм. В работе использовали общегистологические методы окраски срезов (гематоксилином и эозином, по Ван Гизон) - для оценки морфологических изменений (исследовательский микроскоп фирмы "Jenaval"). С помощью гистологических методов исследования изучены процессы репаративной регенерации тканей в области шва анастомоза.
Морфологическая оценка процессов регенерации зоны анастомоза без использования перфторана.
При морфологическом исследовании на 3-и сутки отмечается интенсивная гнойная инфильтрация с некрозом, расплавлением тканей и отторжением омертвевших участков слизистой оболочки. В субэпителиальном, а нередко в мышечном и даже серозном слоях стенки кишки, преимущественно по ходу лигатур, наблюдаются очаги гнойно-некротического воспаления, представленные центрально расположенными участками некроза с перифокальным валом из нейтрофильных лейкоцитов, включениями эозинофилов и плазматических клеток. Также определяются выраженные расстройства кровообращения в слизистой оболочке. К 6-м суткам после операции отмечается уменьшение воспалительной инфильтрации, незначительно изменяется клеточный состав воспалительного инфильтрата, в котором нарастает количество плазматических клеток. Только в этот период выявляется, увеличивается количество фибробластов, начинается формирование сосудов. На 9-е сутки послеоперационного периода в месте шовной нити слизистая оболочка не прослеживается. В то же время встречаются очаги деэпителизации ворсинок поверхностного эпителия по типу острых эрозий с микроочаговой субэпителиальной инфильтрацией лимфогистиоцитарными элементами с примесью плазматических клеток, единичных эозинофилов и нейтрофилов. В этот же период наблюдается формирование перилигатурных гранулем по типу реакции рассасывания "инородных тел" с появлением в окружности лигатур молодой грануляционной ткани, которая представлена новообразованными сосудами капиллярного типа с явлениями периваскулита, коллагеновыми волокнами и умеренным содержанием фибробластов. В группе препаратов, где макроскопически определялась зона несостоятельности, при морфологическом исследовании на 6-е сутки послеоперационного периода слизистая оболочка кишок подвергается дистрофии и субтотальному некрозу, интактными остаются лишь базальные отделы слизистой. В стенке кишки диффузное гнойное воспаление с преобладанием в инфильтрате нейтрофилов и макрофагов. Признаки местного расстройства кровообращения.
Морфологическая оценка процессов регенерации зоны анастомоза при использовании перфторана.
Морфологическое исследование препаратов области анастомоза показало, что на 3 сутки после операции в поверхностном эпителии наблюдается острая воспалительная реакция с очаговым эрозированием и деэпителизацией по линии шва. В субэпителиальной зоне, в проекции эрозий, воспалительный инфильтрат представлен преимущественно нейтрофильными лейкоцитами с примесью эозинофилов и плазматических клеток, отмечается умеренно выраженный отек подслизистого слоя. Уже в эти сроки воспалительная инфильтрация, как правило, не достигает мышечного слоя, а в последнем определяется лишь умеренно выраженный интрамуральный отек. В серозной оболочке по ходу лигатур выявляется очаговая лимфолейкоцитарная инфильтрация. В эпителии желез отмечаются признаки зернистой дистрофии. К исходу 3-х суток интенсивность воспалительной реакции слизистой оболочки зоны анастомоза снижается с изменением клеточного состава инфильтрата. В частности, уменьшается количество нейтрофильных лейкоцитов, повышается число эозинофилов и появляются лимфоциты и единичные макрофаги. В субсерозном и серозном слоях появляются "сосудистые почки" и значительное количество фибробластов, лимфоцитов и макрофагов, свидетельствующих об инициации репаративных процессов в области линии швов. Мышечный слой сохраняет свою нормальную гистологическую структуру, имея признаки слабо выраженного интрамурального отека. К исходу 5-х и началу 6-х суток после операции в поверхностном эпителии наблюдаются умеренные дисрегенераторные изменения в виде очаговой гиперплазии и гиперсекреции гликозаминогликанов. В клеточном составе слизистой оболочки преобладают лимфоидные и плазматические клетки. Очаговые воспалительные инфильтраты в субсерозном и серозном слоях характеризуются довольно четкой демаркационной зоной, представленной формирующейся, достаточно васкуляризированной, соединительной тканью. На 9-е сутки после оперативного вмешательства клеточный состав собственного слоя слизистой оболочки представлен лимфоцитами, гистиоцитами и плазматическими клетками. В мышечном и серозном слоях определяется зрелая грануляционная ткань.
Таким образом, морфологические исследования экспериментального материала показали, что применение перфторана при наложении межкишечных анастомозов в условиях геморрагического шока обеспечивает достаточно высокую регенераторную потенцию всех слоев стенки кишки. Уже к началу 6-х суток после оперативного вмешательства происходит формирование грануляционной ткани, приобретающей зрелый (рубцовый) характер в период с 9 суток, с тотальной эпителизацией линии швов. Без использования перфторана процессы регенерации в области соустья протекают значительно медленнее и характеризуются развитием хронического неспецифического гранулематозного воспаления в области шовных лигатур.
Список литературы
Материалы и методы.
Экспериментальная часть исследования выполнена на 20 беспородных собаках обоего пола весом от 17 до 23 кг. Геморрагический шок воспроизводили однократным массивным выпусканием крови из бедренной артерии в объеме 2,5% от массы тела животного в течение
8-10 минут. Под наркозом выполняли лапаpотомию и накладывали три межкишечных анастомоза "бок в бок", без резекции кишки, на расстоянии 50 сантиметров от связки Трейца - первый анастомоз,
60 сантиметров - второй, 70 сантиметров - третий. Первой группе
(10 собак) после завершения анастомоза внутриартериально струйно вводили перфторан из расчета 6 мл на кг массы тела и физиологический раствор в расчете 10 мл на кг массы тела. Второй группе (10 собак) вводили полиглюкин и физиологический раствор в тех же дозах.
Плановые релапаротомии выполняли на третьи, седьмые и девятые сутки послеоперационного периода. Резецировали один из ранее наложенных анастомозов с восстановлением проходимости кишки анастомозом "конец в конец". Для гистологического исследования область анастомоза иссекали в виде полоски шириной 1,5-2 см и фиксировали в 10% растворе нейтрального забуференного по Лелли формалина. После фиксации из препаратов вырезали участки, которые по общепринятым методикам подвергали проводке, обезвоживанию и заливке в парафиновые блоки. Затем готовили гистологические серийные и ступенчатые срезы толщиной 5-7 мкм. В работе использовали общегистологические методы окраски срезов (гематоксилином и эозином, по Ван Гизон) - для оценки морфологических изменений (исследовательский микроскоп фирмы "Jenaval"). С помощью гистологических методов исследования изучены процессы репаративной регенерации тканей в области шва анастомоза.
Морфологическая оценка процессов регенерации зоны анастомоза без использования перфторана.
При морфологическом исследовании на 3-и сутки отмечается интенсивная гнойная инфильтрация с некрозом, расплавлением тканей и отторжением омертвевших участков слизистой оболочки. В субэпителиальном, а нередко в мышечном и даже серозном слоях стенки кишки, преимущественно по ходу лигатур, наблюдаются очаги гнойно-некротического воспаления, представленные центрально расположенными участками некроза с перифокальным валом из нейтрофильных лейкоцитов, включениями эозинофилов и плазматических клеток. Также определяются выраженные расстройства кровообращения в слизистой оболочке. К 6-м суткам после операции отмечается уменьшение воспалительной инфильтрации, незначительно изменяется клеточный состав воспалительного инфильтрата, в котором нарастает количество плазматических клеток. Только в этот период выявляется, увеличивается количество фибробластов, начинается формирование сосудов. На 9-е сутки послеоперационного периода в месте шовной нити слизистая оболочка не прослеживается. В то же время встречаются очаги деэпителизации ворсинок поверхностного эпителия по типу острых эрозий с микроочаговой субэпителиальной инфильтрацией лимфогистиоцитарными элементами с примесью плазматических клеток, единичных эозинофилов и нейтрофилов. В этот же период наблюдается формирование перилигатурных гранулем по типу реакции рассасывания "инородных тел" с появлением в окружности лигатур молодой грануляционной ткани, которая представлена новообразованными сосудами капиллярного типа с явлениями периваскулита, коллагеновыми волокнами и умеренным содержанием фибробластов. В группе препаратов, где макроскопически определялась зона несостоятельности, при морфологическом исследовании на 6-е сутки послеоперационного периода слизистая оболочка кишок подвергается дистрофии и субтотальному некрозу, интактными остаются лишь базальные отделы слизистой. В стенке кишки диффузное гнойное воспаление с преобладанием в инфильтрате нейтрофилов и макрофагов. Признаки местного расстройства кровообращения.
Морфологическая оценка процессов регенерации зоны анастомоза при использовании перфторана.
Морфологическое исследование препаратов области анастомоза показало, что на 3 сутки после операции в поверхностном эпителии наблюдается острая воспалительная реакция с очаговым эрозированием и деэпителизацией по линии шва. В субэпителиальной зоне, в проекции эрозий, воспалительный инфильтрат представлен преимущественно нейтрофильными лейкоцитами с примесью эозинофилов и плазматических клеток, отмечается умеренно выраженный отек подслизистого слоя. Уже в эти сроки воспалительная инфильтрация, как правило, не достигает мышечного слоя, а в последнем определяется лишь умеренно выраженный интрамуральный отек. В серозной оболочке по ходу лигатур выявляется очаговая лимфолейкоцитарная инфильтрация. В эпителии желез отмечаются признаки зернистой дистрофии. К исходу 3-х суток интенсивность воспалительной реакции слизистой оболочки зоны анастомоза снижается с изменением клеточного состава инфильтрата. В частности, уменьшается количество нейтрофильных лейкоцитов, повышается число эозинофилов и появляются лимфоциты и единичные макрофаги. В субсерозном и серозном слоях появляются "сосудистые почки" и значительное количество фибробластов, лимфоцитов и макрофагов, свидетельствующих об инициации репаративных процессов в области линии швов. Мышечный слой сохраняет свою нормальную гистологическую структуру, имея признаки слабо выраженного интрамурального отека. К исходу 5-х и началу 6-х суток после операции в поверхностном эпителии наблюдаются умеренные дисрегенераторные изменения в виде очаговой гиперплазии и гиперсекреции гликозаминогликанов. В клеточном составе слизистой оболочки преобладают лимфоидные и плазматические клетки. Очаговые воспалительные инфильтраты в субсерозном и серозном слоях характеризуются довольно четкой демаркационной зоной, представленной формирующейся, достаточно васкуляризированной, соединительной тканью. На 9-е сутки после оперативного вмешательства клеточный состав собственного слоя слизистой оболочки представлен лимфоцитами, гистиоцитами и плазматическими клетками. В мышечном и серозном слоях определяется зрелая грануляционная ткань.
Таким образом, морфологические исследования экспериментального материала показали, что применение перфторана при наложении межкишечных анастомозов в условиях геморрагического шока обеспечивает достаточно высокую регенераторную потенцию всех слоев стенки кишки. Уже к началу 6-х суток после оперативного вмешательства происходит формирование грануляционной ткани, приобретающей зрелый (рубцовый) характер в период с 9 суток, с тотальной эпителизацией линии швов. Без использования перфторана процессы регенерации в области соустья протекают значительно медленнее и характеризуются развитием хронического неспецифического гранулематозного воспаления в области шовных лигатур.
Список литературы
