Особенности подготовки проб крови для исследования морфологических параметров и структуры мембран эритроцитов методов атомно-силовой микроскопии Medline.ru - медико-биологический информационный портал Медлайн.ру

Особенности подготовки проб крови для исследования морфологических параметров и структуры мембран эритроцитов методов атомно-силовой микроскопии

Белоусова О.Д.1, Толмачев И.А.1, Гайдаш А.А.1,
Левичев В.В.2, Жуков М.В.2, Белоусов И.С.1

1ФГВОУ ВПО Военно-медицинская академия имени С.М. Кирова МО РФ, кафедра судебной медицины
7991866@gmail.com)
2Санкт-Петербургский Национальный Исследовательский Университет Информационных технологий, механики и оптики, кафедра нанотехнологий и материаловедения

Резюме
В статье представлены результаты сравнительных исследований различных методов пробоподготовки крови крыс для проведения атомно-силовой микроскопии эритроцитов. Продемонстрированы результаты различных вариантов подготовки проб крови для выполнения прецизионных исследований, наиболее часто описываемые в литературе. Показано, что оптимальным, позволяющим исследовать не только размеры эритроцитов (диаметр, высоту и глубину центральной впадины диска), но и наноразмерные структуры мембраны (поры в мембране эритроцитов), является метод фиксации мазка крови высушиванием на воздухе.

Ключевые слова
мазок крови, подготовка пробы, размеры эритроцитов, атомно-силовая микроскопия, глутаровый альдегид, этиловый спирт.

(статья в формате PDF. Для просмотра необходим Adobe Acrobat Reader)

открыть статью в

новом окне

Список литературы

1. Chen Y ., Cai J . Membrane deformation of unfixed erythrocytes in air with time lapse investigated by tapping mode atomic force microscopy // Micron. - 2005. - Vol. 37(4). - P.339- 346.

2. Strasser S., Zink A., Kada G., Hinterdorfer P., Peschel O., Heckl W.M., Nerlich A.G., Thalhammer S. Age determination of blood spots in forensic medicine by force spectroscopy // Forensic Sci Int. - 2007. - Vol. 170(1). - P.8-14.

3. Mozhanova A. A., Nurgazizov N. I., Bukharaev A. A. Local elastic properties of biological materials studied by SFM //. Proc. of the SPM-2003. – 2003, March 2–5. - Nizhni Novgorod. - P.266–267.

4. Takeuchi M., Miyamoto H., Sako Y., Komizu H., Kuzumi A. Structure of the erythrocyte membrane skeleton as observed by atomic force microscopy // Biophysical J. - 1998. - Vol.74. – P.2171–2183.

5. Hofmann U. G., Rotsch C., Parak W. J., Radmacher M. Investigating the cytoskeleton of chicken cardiocytes with the atomic force microscope // J. of Structural Biology. – 1997. - Vol. 119. – P.84–91.

6. Shroff S. G., Saner D. R., Lal R. Dynamic micromechanical properties of cultured rat atrial myocytes measured by atomic force microscopy //American J. of Physiology (Cell Physiology 38). – 1995. - Vol. 269. - P.286–292.

7. Kubo N., Hirota R., Okada T., Ohara T., Kawano M., Itoh K. Structural Analysis Using Atomic Force Microscopy of the Surface of Red Blood Cells to Detect Anti-Red Blood Cell Autoantibody // Laboratory Hematology. – 2003. - Vol.9. – P.47-49.

8. Hekele O., Goesselsberger C.G., Gebeshuber I.C. Nanodiagnostics performed on human red blood cells with atomic force microscopy // Materials Science and Technology. – 2008. - Vol. 24(9). - P.1162-1165.

9. Ji X.-L., Ma Y.-M., Yin T., Shen M.-S., Xu X., Guan W. Application of atomic force microscopy in blood research // World J. Gastroenterol. – 2005. - Vol.11(10). – P.1709-1711.

10. Shroff S. G., Saner D. R., Lal R. Dynamic micromechanical properties of cultured rat atrial myocytes measured by atomic force microscopy //American J. of Physiology (Cell Physiology 38). – 1995. - Vol.269. - P.286–292.

11. Liu F., Burgess J., Mizukami H., Ostafin A. Sample preparation and imaging of erythrocyte cytoskeleton with the atomic force microscopy // Cell. Biochem . Biophys . – 2003. - Vol.38(3). – P.251-270.

12. Симонов В.В., Канев И.П., Федорова М.З., Везенцев А.И., Надеждин С.В., Симон Е.В. Оценка влияния наночастиц маггемита (у-Fe2O3) и лепидокрокита (у-FeOОН) на клетки крови крыс после однократного интрагастрального введения // Научные ведомости. Серия Естественные науки. 2010. - № 9(80). – Вып. 11. – С.94-98.

13. Савченко С. В., Степанищев И. В., Кузнецов Е. В. Эффективность использования метода фиксации при заборе органов и тканей для электронного микроскопического исследования [Электронный ресурс] // Актуальные вопросы судебной медицины и экспертной практики. – Электронный судебно-медицинский журнал. – Новосибирск. – 2009. – Доступ: http :// journal . forens - lit . ru / node /156 .