Опубликовать статью

Информационное партнерство

Инфоресурсы

Контакты

ТОМ 2, СТ. 49 (сc. 223-297) // 28-31 мая 2001 г.,

Юбилейная X Конференция "Нейроиммунология"

---

В настоящее время общепризнанной является ключевая роль иммунопатологических механизмов в патогенезе РС. Не смотря на то, что иммунопатогенез заболевания остается не вполне ясным, ведущие отечественные и зарубежные исследователи полагают, что непосредственное участие аутоиммунных реакций в разрушении миелина и нарушении проведения нервного импульса не вызывает сомнения. Убедительные данные, подтверждающие эту точку зрения изложены в последних монографиях Гусева, Кессельринга, Абрамски и др.
Основное внимание уделяется нарушению баланса индукторного звена Т-клеточного иммунитета и, как следствие, изменению субпопуляционной дифференцировки иммуноцитов в сторону чрезмерной активации эффекторных клеток и гиперпродукции провоспалительных цитокинов.
Интенсивные исследования в области нейроиммунологии, ведущиеся в крупнейших научных центрах мира, ознаменовались разработкой целого ряда генноинженерных иммунотропных препаратов (в основном относящихся к классу противовоспалительных цитокинов), способных влиять на течение заболевания.
Следует однако отметить, что все перечисленные препараты способны лишь замедлять (но не останавливать) прогрессирование заболевания у ограниченного процента больных. Кроме того, введение экзогенных цитокинов часто сопровождается развитием серьезных побочных эффектов (местные воспалительные реакции и некрозы в месте введения, депрессивные состояния, общее гриппоподобное состояние) и выработкой нейтрализующих антител при длительных курсах терапии.
В связи с этим, крайне актуальной остается проблема изучения тонких механизмов специфичных для рассеянного склероза аутоиммунных процессов и разработка методов селективной иммуномодуляции препаратами с прогнозируемыми направленными эффектами.
В литературе описано иммуномодулирующее действие препаратов оральных энзимов (в состав которых входят гидролитические ферменты животного и растительного происхождения) при различных аутоиммунных заболеваниях, таких как системная красная волчанка, ревматоидный артрит, синдром Рейтера и другие. В ряде публикаций отмечен положительный эффект системной энзимотерапии у больных с аутоиммунными демиелинизирующими заболеваниями нервной системы. В настоящий момент в Европе проводится мультицентровое двойное слепое плацебо-контролируемое исследование эффективности применения данных препаратов при РС.
Целью нашего исследования был анализ иммунологических перестроек у больных РС в ходе терапии препаратом из группы оральных энзимов - флогэнзимом, выявление основных иммунологических мишеней препарата и расширение представлений о возможностях селективной иммуномодуляции при данном заболевании.

Материалы и методы.
В опытную группу вошли 30 больных (20 женщин и 10 мужчин) в течение 12 месяцев получавшие ежедневно стандартную дозу препарата (по 2 таб. 3 раза в день). Во всех наблюдениях диагноз РС был установлен как определенный согласно критериям Позера. Длительность заболевания составляла от 7 до 14 лет. У 19 пациентов тип течения был определен как ремиттирующий, а у 11 - вторично прогрессирующий (в начальной стадии перехода в прогрессирующую форму). Возраст больных колебался от 29 до 53 лет. Степень инвалидизации по шкале EDSS (расширенная шкала инвалидизации) до начала лечения составляла от 3 до 6 баллов. Обязательным условием для включения в опытную группу было наличие не менее двух обострений за последние 2 года, время, прошедшее с последнего обострения не менее 3 месяцев.
Группу сравнения составили 30 больных РС со сходными показателями (16 женщин 14 мужчин, возраст от 24 до 49 лет, от 2 до 6 баллов по EDSS), не получавшие препаратов с известным иммунотропным действием.
Контрольную группу при изучении иммунологических перестроек составляли 36 практически здоровых лиц.
Неврологическое и иммунологическое обследование больных опытной группы и группы сравнения проводилось до курса терапии и каждые 3 месяца в дальнейшем.
Параметрами оценки клинической эффективности применения флогэнзима являлись: число обострений заболевания на пациента и прогрессирование инвалидности по шкале EDSS.

Иммунологические методы:
· определение количества субпопуляций иммунокомпетентных клеток CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD22+, CD25+ иммунофлюоресцентным методом
· определение цитотоксической активности ЕК радиометрическим методом
· изучение активности нейтрофилов в тесте восстановления нитросинего тетразолия (НСТ)
· изучение продукции провоспалительных цитокинов ИЛ-1b, ИЛ-6 и ФНО-a (ИФА)
· определение степени чувствительности иммуноцитов к нейроспецифичным антигенам (протеину S-100, основному белку миелина, антигену нейрональных мембран и галактоцереброзидам)

Результаты.
Исходно у больных выявлено снижение общего количества зрелых Т-лимфоцитов (CD3+) и дисбаланс между субпопуляциями Т-клеток. Количество CD3+ лимфоцитов снижалось до 85.6% от нормы в основном за счет уменьшения уровня субпопуляции хелперных/индукторных CD4+ клеток (75.4% от нормы). В тоже время уровень эффекторных/цитотоксических лимфоцитов CD8+, достоверно не отличался от нормальных показателей. Наличие иммунорегуляторного дисбаланса отражалось на величине соотношения хелперных/индукторных и цитотоксических лимфоцитов (CD4+/CD8+), которое составляло 80% от нормы. Кроме того, отмечено увеличение количества клеток, несущих активационный маркер CD25+ при одновременном снижении количества и цитотоксической активности естественных киллеров (ЕК). Количество В-лимфоцитов (CD22+) несколько превышало нормальные значения, однако различие с контролем не было достоверным.
Фагоцитарная активность нейтрофилов в НСТ-тесте характеризовалась снижением РК до 29% по сравнению с контрольной группой, в основном за счет повышения базального НСТ, который составил 321% от нормы.
При изучении уровня спонтанной и митоген-индуцированной продукции иммуноцитами основных провоспалительных цитокинов было выявлено значительное повышение спонтанной и индуцированной продукции ФНО-альфа (280 и 390%) и ИЛ-1бета (234 и 200%) от нормы. При этом базальный уровень продукции ИЛ-6 был также несколько повышен (120%), однако различие с контролем не было достоверным. В то же время, стимулированная продукция ИЛ-6 была достоверно снижена (70% от нормы).
Изменения субпопуляционного состава и цитокинового статуса сопровождались гиперчувствительностью иммунокомпетентных клеток к нейроспецифическим антигенам: белку S-100, ОБМ, АНМ и галактоцереброзидам. Индекс адгезии в РТАЛ достоверно отличался от показателей контрольной группы.
По окончанию 12 месячного курса терапии флогэнзимом у больных рассеянным склерозом наблюдалось увеличение общего числа Т-лимфоцитов, преимущественно за счет хелперных/индукторных клеток, количество которых не имело достоверных отличий от контроля, но достоверно отличалось от группы сравнения. Нормализация субпопуляционного состава иммунокомпетентных клеток сопровождалась повышением исходно сниженного соотношения хелперных/индукторных и цитотоксических лимфоцитов (CD4+/CD8+), повышением количества ЕК и нормализацией их цитотоксической активности. Также имело место достоверное снижение количества активированных иммуноцитов (CD25+).
При анализе показателей фагоцитарной активности нейтрофилов установлено, что за счет снижения показателей базального НСТ значительно увеличивался РК, который достигал 57% от нормы.
Изучение уровня продукции иммуноцитами цитокинов показало существенное снижение как спонтанной, так и индуцированной продукции ФНО-альфа и ИЛ-1бета, которые достоверно отличались от показателей группы сравнения. В тоже время наблюдалось значимое повышение индуцированной продукции ИЛ-6 при одновременном снижении спонтанной продукции последнего.
Адгезивная активность клеток в присутствие протеина S-100 несколько усиливалась, а при постановке реакции с ОБМ, АНМ и галактоцереброзидами, ИА повышался и после курса терапии достоверно не отличался от показателей контрольной группы.
При оценке клинической эффективности применения флогэнзима было показано достоверное замедление прогрессирования инвалидизации по шкале EDSS, в тоже время снижение частоты обострений хотя и наблюдалось в опытной группе, но было недостоверным.

Выводы.

Таким образом, применение флогэнзима у больных РС сопровождалось:
нормализацией субпопуляционной структуры иммуноцитов за счет повышения исходно сниженного количества и активности индукторных клеток, некоторым снижением чрезмерной активации эффекторного звена Т-клеточного иммунитета, тенденцией к восстановлению активности нейтрофилов, баланса цитокинового профиля пациентов и повышением индекса адгезии в реакции с основными нейроспецифическими антигенами, что свидетельствует об уменьшении гиперчувствительности лимфоцитов к данным нейроспецифичным антигенам и подтверждает ослабление активности иммунопатологических процессов.
Положительные изменения со стороны иммунной системы сопровождались достоверным замедлением прогрессирования инвалидизации по шкале EDSS.
Полученные нами данные свидетельствуют о перспективности применения препаратов оральных энзимов в патогенетической терапии рассеянного склероза. Представляется необходимым проведение дальнейших исследований для разработки и оптимизации практических критериев назначения препаратов оральных энзимов больным рассеянным склерозом при различных стадиях и формах заболевания, а также в зависимости от фоновых иммунологических показателей.