Медико-биологический
информационный портал
для специалистов
 
БИОМЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ Medline.ru

СОДЕРЖАНИЕ ЖУРНАЛА:
Физико-химическая биология

Клиническая медицина

Профилактическая медицина

Медико-биологические науки


АРХИВ:

Фундаментальные исследования

Организация здравохраниения

История медицины и биологии



Последние публикации

Поиск публикаций

Articles

Архив :  2000 г.  2001 г.  2002 г. 
               2003 г.  2004 г.  2005 г. 
               2006 г.  2007 г.  2008 г. 
               2009 г.  2010 г.  2011 г. 
               2012 г.  2013 г.  2014 г. 
               2015 г.  2016 г. 

Редакционная информация:
        Опубликовать статью
        Наша статистика


 РЕДАКЦИЯ:
Главный редактор

Заместители главного редактора

Члены редколлегии
Специализированные редколлегии


 УЧРЕДИТЕЛИ:
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки
"Институт токсикологии Федерального медико-биологического агентства"
(ФГБУН ИТ ФМБА России)

Институт теоретической и экспериментальной биофизики Российской академии наук.

ООО "ИЦ КОМКОН".




Адрес редакции и реквизиты

199406, Санкт-Петербург, ул.Гаванская, д. 49, корп.2

ISSN 1999-6314

Российская поисковая система
Искать: 


ТОМ 5, СТ. 34 (стр. 132-133) //

ПЕРФТОРАН МИНИМИЗИРУЕТ ПОВРЕЖДАЮЩИЙ ЭФФЕКТ ИШЕМИИ ТОНКОЙ КИШКИ

А.А.Голубев, Д.А.Басараб, В.Л.Кожура, В.В.Мороз
ГУ НИИ общей реаниматологии РАМН, Московская медицинская академия им. И.М.Сеченова, Москва.


Введение

Проблема противоишемической защиты органов и тканей в практике интенсивной терапии, хирургии и особенно трансплантологии по-прежнему является одной из наиболее актуальных задач современной медицины. Открытие и неоднократное подтверждение в эксперименте и в клинике противоишемических и цитопротекторных свойств перфторуглеродных эмульсий [1, 2, 3], тем не менее, требует дальнейшего изучения и расширения спектра клинического применения. Учитывая все более возрастающий интерес исследователей и клиницистов к проблеме интестинальной трансплантации [4, 5, 6], а также основываясь на собственном опыте изучения эффективности действия перфторана в реперфузионную фазу острой критической ишемии тонкой кишки [7, 8], нами предпринято исследование противоишемических эффектов этого полифункционального препарата при его предварительном введении до начала ишемического периода.

Материалы и методы исследований

 Эксперименты были проведены на 10-ти белых беспородных крысах-самцах массой 250 г - 320 г. Опытная и контрольная группы составили по 5 животных. Общая анестезия достигалась внутрибрюшинным введением суспензии этаминал-натрия в дозе 6 мг на 100 г массы тела животного. Проводился мониторинг частоты сердечных сокращений и среднего давления крови в хвостовой артерии. 

Ишемию петли тонкой кишки длиной 5-6 см создавали в условиях нормотермии наложением турникета (Русанов И.Г., 1928; Долгов М.А., 1965) до полного прекращения кровотока в исследуемом сегменте. Предварительно в хвостовую артерию вводили гепарин из расчета 30 МЕ/100 г массы тела животного. Длительность ишемии составила 90 минут. Перфторан или физиологический раствор вводили в хвостовую артерию за 15 минут до начала ишемии в среднетерапевтической дозировке: 0.5-0.7 мл/ 100 г массы тела. После восстановления кровотока длительность наблюдений составила 90 минут, после чего животные выводились из эксперимента передозировкой анестетика. Блоки тонкой кишки, взятые из зоны ишемии, а также участков, примыкающих к ней, фиксировали в 10% нейтральном формалине и заливали в парафин. Гистологические срезы окрашивали гематоксилин-эозином, проводилась ШИК-реакция. Для ориентировочной количественной оценки степени морфологических изменений слизистой тонкой кишки использовали метод, предложенный C.J.Chiu и соавт. (1970)[9]:

·    0ст.- интактная слизистая; 

·    Iст.- появление субэпителиальных пространств на верхушках ворсинок

·    IIст.- пространства увеличиваются, приводя к слущиванию эпителия с верхушек

·    ворсинок

·    IIIст.- более протяженное слущивание эпителия, спускающееся с верхушек на

·    тело ворсинок

·    IVст.- практически полностью лишенные эпителия, "голые" ворсинки

·    Vст.-дезинтеграция lamina propria, кровоизлияния и изъязвления,

·    распространяющиеся в том числе и на глубжележащие слои.

Результаты

Предварительное введение перфторана перед наложением турникета повышает устойчивость структурных элементов тонкой кишки к ишемии. Через 90 минут полной ишемии тонкой кишки сохраняется структура ее слизистой оболочки, ворсинки сохранены по всей поверхности. В структуре эпителиальной выстилки обнаруживается много бокаловидных клеток. Секрет бокаловидных клеток выделяется в просвет кишки, где также содержатся комплексы слущенных эпителиальных клеток. В глубоких отделах крипт видны многочисленные митозы. В цитоплазме клеток Панета обнаруживаются гранулы. В строме ворсин содержится умеренное количество нейтрофилов и лейкоцитов. Капилляры некоторых ворсин расширены и полнокровны. В отдельных ворсинах тонкой кишки отмечаются очаги субэпителиального отека. Эритроциты, содержащиеся в просвете сосудов, с четкими контурами, признаки их агрегации отсутствуют. Не определяются расстройства кровообращения в виде стазов и кровоизлияний. Отек подслизистого слоя отсутствует. Гладкомышечные клетки мышечного слоя стенки тонкой кишки с хорошо окрашенными ядрами. Нейроны нервных сплетений с четкими контурами, хорошо окрашенными ядрами, в которых визуализируются ядрышки. В некоторых нейронах цитоплазма окрашена более интенсивно. Лимфоидные фолликулы без особенностей. Сосуды брыжейки умеренно полнокровны. В целом картина соответствует 0-I степени повреждений слизистой по C.J.Chiu.

В контрольных опытах с предварительным введением физиологического раствора регистрировались выраженный отек субэпителиального пространства ворсин тонкой кишки, слущивание эпителия апикальных отделов ворсин в просвет кишки, расширение лимфатических капилляров и умеренные дистрофические изменения нейронов подслизистых и межмышечных сплетений. Визуализируемая картина соответствует II степени повреждений слизистой по C.J.Chiu.

Через 90 минут после восстановления кровотока: а) в опытной группе животных с пердварительным введением перфторана отмечается более значительное повреждение ворсин тонкой кишки. Отсутствует их эпителиальный покров, многие ворсины сглажены, укорочены. Отмечаются расстройства кровообращения в виде полнокровия вен, капилляров, периваскулярных кровоизлияний. В просвете кишки определяются комплексы слущенного эпителия, эритроциты. В отдельных нейронах нервных сплетений ядра не окрашены. Структура гладкомышечных клеток сохранена, в части из них видны небольшие перинуклеарные вакуоли. В брыжейке тонкой кишки выявляются небольшие периваскулярные кровоизлияния, венозное полнокровие. В то же время на значительном протяжении в глубоких отделах слизистой оболочки (основание ворсин и крипты) эпителиальная выстилка сохранена. Количество митозов эпителиоцитов уменьшено. В строме ворсин содержатся лимфоциты и небольшое количество сегментоядерных лейкоцитов. Лимфоидные фолликулы полнокровны, их структура сохранена. Указанные изменения больше соответствуют III степени расстройств по C.J.Chiu.

б) в контрольной группе животных с предварительным введением физиологического раствора отмечаются более интенсивные морфологические изменения в стенке тонкой кишки. На значительном протяжении слизистой оболочки ворсинки не определяются, эпителиальная выстилка практически полностью отсутствует, в просвете тонкой кишки видны пласты некротизированного слущенного эпителия. В единичных сохранившихся криптах эпителий слущен, с признаками кариопикноза и кариорексиса. Резко выражены расстройства кровообращения. Вены расширены, полнокровны, определяется краевое стояние лейкоцитов. Выявляются массивные многочисленные кровоизлияния в строме слизистой оболочки. Лимфатические капилляры значительно расширены. Выражен отек подслизистого слоя. Вакуольная дистрофия гладкомышечных клеток. Нейроны нервных сплетений деформированы, в некоторых из них ядра не окрашены, отмечается процесс нейронофагии. В брыжейке тонкой кишки - многочисленные кровоизлияния. В этих препаратах картина соответствует IV-V степени дезорганизации слизистой по C.J.Chiu.

Заключение

Основываясь на полученных результатах, мы полагаем, что предварительное введение в системный кровоток небольших объемов перфторана в условиях нормоксии способно достаточно эффективно ослаблять структурные изменения, вызванные ишемией тонкой кишки и следующие за ними реперфузионные повреждения. Несмотря на полученные рядом авторов противоишемические эффекты регионарного применения оксигенированных перфторуглеродных эмульсий в полость брюшины и в просвет кишечника [10, 11], мы, тем не менее, придерживаемся более традиционного и логичного, с точки зрения механизмов реализации кислородопереносящих и негазотранспортных свойств перфторана, способа введения эмульсии в системный кровоток. Это положение, кроме прочего, представляется нам более предпочтительным и в связи с перспективой использования перфторана при острых ишемических расстройствах тонкой кишки в условиях клиники.

  Литература


  1. Исламов Б.И. Противоишемическая защита миокарда эмульсией перфторуглеродов (экспериментальное исследование). Дисс. докт. мед. наук. Пущино, 1987.- 283 с.
  2. Mohan C., Gennaro M., Ascer E. Reduction of the extent of ischemic sceletal muscle necrosis by perfusion with oxygenated perfluorocarbon. Am. J. Surg., 1992.- vol. 164.- N. 9.- р. 194-198.
  3. Распутин П.Г. Применение эмульсии перфторорганических соединений в резекционной хирургии печени (экспериментально-клиническое исследование). Автореф. дисс. докт. мед наук. Пермь, 2000.- 46 с.
  4. Grant D. Intestinal transplantation: 1997 report of the international registry. International transplant registry. Transplantation, 1999.- vol. 67.- N. 4.- p. 1061-1064.
  5. Minor T., Isselhard W. Cellular signal level of cyclic AMP and functional integrity of the small bowel after ischemic preservation: and experimental pilot study in the rat. Eur. Surg. Res., 1998.- vol. 30.- No. 2.- p. 144-148.
  6. Hyon S.H., Christiansen S., Argibay P., Sung H.H. Small intestine transplantation/ Experimental microsurgical model in rats. Acta Gastroenterol. Latinoam., 1995.- vol. 25.- N. 1.- p. 9-16.
  7. Голубев А.М., Басараб Д.А., Кожура В.Л., Мороз В.В., Яковлева Н.Е. Коррекция перфтораном постишемических изменений в тонкой кишке (экспериментальное исследование)// Физиологически активные вещества на основе перфторуглеродов в экспериментальной и клинической медицине. СПб, 2001.- c. 15-16.
  8. Голубев А.М., Басараб Д.А., Кожура В.Л., Мороз В.В., Яковлева Н.Е. Влияние перфторана на развитие реперфузионных изменений в тонкой кишке// Труды НИИ общей реаниматологии РАМН.- Т. 2. Фундаментальные проблемы реаниматологии.- Москва, 2001.- c. 115-118.
  9. Chiu C.J., McArdle A.H., Brown R., Scott H.J., Gurd F.N.: Intestinal mucosal lesions in low-flow states. I. A morphological, hemodynamic and metabolic reappraisal// Arch. Surg.- 1970.- vol. 101.- p. 478-483.
  10. Ohara M., Unno N., Mitsuoka H., Kaneko H., Nakamura S. Peritoneal lavage with oxygenated perfluorochemical preserves intestinal mucosal barrier function after ischemia-reperfusion and ameliorates lung injury. Crit. Care Med., 2001.- vol. 29.- N. 4.- p. 782-788.
  11. O'Donnell K.A., Caty M.G., Zheng S., Rossman J.E., Azizkhan R.G. Oxygenated intraluminal perfluorocarbon protects intestinal mucosa from ischemia/reperfusion injury. J. Pediatr. Surg., 1997.- vol. 32.- N. 2.- p. 361-365.


Страница вверх
Свидетельство о регистрации сетевого электронного научного издания N 077 от 29.11.2006
Журнал основан 16 ноября 2000г.
Выдано Министерством РФ по делам печати, телерадиовещания и средств массовых коммуникаций
(c) Перепечатка материалов сайта Medline.Ru возможна только с письменного разрешения редакции

Размещение рекламы

Rambler's Top100