Медико-биологический
информационный портал
для специалистов
 
БИОМЕДИЦИНСКИЙ ЖУРНАЛ Medline.ru

СОДЕРЖАНИЕ ЖУРНАЛА:
Физико-химическая биология

Клиническая медицина

Профилактическая медицина

Медико-биологические науки


АРХИВ:

Фундаментальные исследования

Организация здравохраниения

История медицины и биологии



Последние публикации

Поиск публикаций

Articles

Архив :  2000 г.  2001 г.  2002 г. 
               2003 г.  2004 г.  2005 г. 
               2006 г.  2007 г.  2008 г. 
               2009 г.  2010 г.  2011 г. 
               2012 г.  2013 г.  2014 г. 
               2015 г.  2016 г.  2017 г. 

Редакционная информация:
        Опубликовать статью
        Наша статистика


 РЕДАКЦИЯ:
Главный редактор

Заместители главного редактора

Члены редколлегии
Специализированные редколлегии


 УЧРЕДИТЕЛИ:
Федеральное государственное бюджетное учреждение науки
"Институт токсикологии Федерального медико-биологического агентства"
(ФГБУН ИТ ФМБА России)

Институт теоретической и экспериментальной биофизики Российской академии наук.

ООО "ИЦ КОМКОН".




Адрес редакции и реквизиты

199406, Санкт-Петербург, ул.Гаванская, д. 49, корп.2

ISSN 1999-6314

Российская поисковая система
Искать: 


ТОМ 5, СТ. 7 (стр. 36-39) //

ВЛИЯНИЕ ЭКЗОГЕННОЙ СУПЕРОКСИДДИСМУТАЗЫ НА АКТИВНОСТЬ СУПЕРОКСИДДИСМУТАЗЫ В НЕЙТРОФИЛАХ И МОНОНУКЛЕАРАХ У БОЛЬНЫХ С ОСТРЫМ ГЕПАТИТОМ В

Коробова М.В.,(1) Зыбина Н.Н.,(1) Андреева С.Г.,(2) Чурилова И.В., (3) Дроздова Ю.И., (3) Леонова Н.В. (3)

(1) Всероссийский центр экстренной и радиационной медицины МЧС России,
(2)Городская инфекционная больница © 30,
(3)ГосНИИ ОЧБ, Санкт-Петербург


Активация процессов свободнорадикального окисления лежат в основе патогенеза многих вирусных заболеваний печени, причем избыточное образование активных форм кислорода (АФК) проявляется на самых ранних стадиях процесса (Нагоев Б. С. и соавт, 2003; Loguercio еt al., 2003).

Тяжесть течения и прогноз развития заболеваний печени тесно связаны с функциональным состоянием антиоксидантной системы гепатоцитов (Никитин Е.В. и соавт., 1998). Для окислительного стресса в первую очередь характерно нарушение в соотношении анти- и прооксидантных систем в сторону повышения активности последней. Начальные этапы запуска реакции генерации АФК при различных патологических состояниях могут отличаться, но уже на следующих этапах направленность и интенсивность свободнорадикальных процессов теряют свою специфичность и зависят от состояния и степени мобилизации антиоксидантной защиты (Клебанов Г.И. и соавт., 1999).

Среди лекарственных средств, нормализующих уровень АФК и продуктов ПОЛ, особое место принадлежит препаратам СОД - окислительно-восстановительного фермента (КФ 1.15.1.1.), являющегося основным компонентом антиоксидантной защиты всех про- и эукариотических клеток (Чурилова И.В. и соавт., 2002).

Целью проводимого исследования явилась оценка влияния экзогенной рекомбинантной супероксиддисмутазы человека на активность эндогенной супероксиддисмутазы в нейтрофилах и мононуклеарах у больных с острым гепатитом В.

ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ БОЛЬНЫХ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

Было обследовано 30 пациентов c диагнозом - острый гепатит В. Диагноз был подтвержден наличием HВsAg. Исследования проводились в острый период заболевания. У больных отмечались желтушность, интоксикация различной степени выраженности, увеличение размеров печени, выраженный цитолитический синдром.

Первую группу составили 15 больных в возрасте от 17 до 68 лет (8 женщин и 7 мужчин). Данная группа больных получала базисную терапию - инфузии 5% раствора глюкозы, физиологического раствора, солевых растворов, спазмолитиков, витаминов. Во вторую группу вошли 15 пациентов в возрасте от 17 до 60 лет (12 мужчин и 3 женщины). Эта группа пациентов, кроме базисной терапии, прошла курс антиоксидантной терапии препаратом Рексод (производство ООО "Рэсбио" и НПП "Трис"). Препарат вводился внутривенно капельно по 32 мг ежедневно в течении 10 дней. Оценку лечебной эффективности препарата осуществляли согласно регламентированному стандарту условий, обеспечивающих достоверность и сопоставимость результатов, в соответствии с рекомендациями ВОЗ и директивами Фармкомитета МЗ РФ. Всегда имелось заключение этической комиссии и информированное согласие пациентов.

Исследование было проведено с соблюдением правил двойного слепого плацебо контролируемого рандомизированного метода.

Клетки выделяли из периферической крови по модифицированной методике на фиколл-верографиновом градиенте (Зыбина Н.Н., Лавинская Н.Н., 1994). 8 мл крови забирали в пробирку с 3 мл полиглюкина и 2 каплями гепарина. Кровь отстаивали 60 мин. при температуре 25° С. Для разделения лейкоцитов плазму, обогащенную лейкоцитами, наслаивали на 2 мл среды с градиентом плотности 1.077 и центрифугировали 35 мин. при 1500 об./мин. После центрифугирования удаляли верхний слой плазмы, переносили кольцо клеток с мононуклеарами (лимфоциты и моноциты) и тромбоцитами в чистую пробирку и удаляли оставшийся слой среды. На дне пробирки оставался осадок нейтрофилов и немного эритроцитов. Затем к суспензии мононуклеаров и тромбоцитов добавляли равный объем раствора Версена и центрифугировали 5 мин. при 1000 об/мин. При этом лимфоциты и моноциты оказывались в осадке, а тромбоциты в супернатанте. Осадок мононуклеаров ресуспендировали в 1 мл среды Хенкса и подсчитывали количество клеток. К осадку нейтрофилов с эритроцитами добавляли 2 мл воды и ровно через 30 секунд добавляли 2 мл 1,8% физиологического раствора и перемешивали. Центрифугировали 5 мин. при 1000 об./мин., супернатант сливали, а нейтрофилы ресуспендировали в 1 мл среды Хенкса и подсчитывали количество клеток.

Разводили суспензию клеток таким образом, чтобы в 1 мл содержалось 4 миллиона клеток. Активность супероксиддисмутазы в нейтрофилах и мононуклеарах проводили ксантин-ксантиноксидазным методом с использованием реактивов фирмы "RANDOX".

Статистическую обработку полученных результатов осуществляли с использованием Т-критерия Вилкоксона.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

Анализ данных показал отсутствие достоверных различий исследуемых параметров между двумя группами, до лечения (табл.1), что позволило в дальнейшем оценить влияние препарата Рексод. В результате исследований активности фермента у пациентов до проведения терапии было отмечено, что активность СОД в нейтрофилах и более значительно в мононуклеарах в обеих группах была снижена.

Повторно пациенты обследовались после проведенной терапии. При оценке изменения активности фермента было выявлено, что активность СОД в мононуклеарах и нейтрофилах в ходе терапии возросла в обеих группах по отношению к первоначальным значениям. Однако в группе пациентов с базисной терапией эти изменения были не достоверны и активность супероксиддисмутазы не нормализовалась (табл. 1).

Таблица 1.
Показатели активности СОД в нейтрофилах и мононуклеарах у пациентов с острым гепатитом B в зависимости от проводимой терапии.


Наименование параметра

Единицы

Нормаль-

ные значения

Группы пациентов

I

II

до лечения (n=15)

После лечения (n=15)

до лечения (n=15)

после лечения (n=15)

СОД нейтр.

Отн.ед./млн кл.

32,50

(2,50)

27,00(*)

(3,70)

30,17

(3,73)

26,95(*)

(4,92)

38,58 (v)

(5,01)

СОД мон.

Отн.ед./млн кл.

32,50

(2,50)

21,23(*)

(8,10)

26,05

(8,16)

22,70(*)

(4,41)

33,53 (v)

(5,51)



Примечание: первой группе пациентов проводилась базисная терапия; второй кроме базисной проводилась, антиоксидантная терапия препаратом Рексод; (v)- достоверные изменения после проведенной терапии; (*)- различия по сравнению с нормой (Р<0,05)

В группе пациентов с терапией рекомбинантным препаратом Рексод, эти значения возросли на 25% (р<0,05) и 33% (р<0,05) больше, чем в группе сравнения соответственно (табл. 1).

Таким образом, применение рекомбинантной СОД человека (препарата Рексод) в схеме терапии острого вирусного гепатита В способствовало увеличению активности ключевого фермента антиоксидантной защиты организма (супероксиддисмутазы) в нейтрофилах и мононуклеарах. Сохранение активности СОД в клетках позволит уменьшить эффекты окислительного стресса и повысить устойчивость гепатоцитов к действию свободных радикалов.

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Дубинина Е.Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состоянии окислительного стресса // Вопр. Мед.химии 2001 т.47 ©6 С.561-58

2. Дроздова Ю.И. Выделение и изучение свойств супероксиддисмутазы человека из рекомбинантного штамма дрожжей Saccharomyces cerevisiae, Автореферат диссертации канд. Биологических наук. С-Петербург 1997 20с.

3. Чурилова И.В., Зиновьев Е.В., Парамонов Б.А., Дроздова Ю.И., Сидельников В.О. Препарат эритроцитарной супероксиддисмутазы "Эрисод": влияние на уровень обожженных в состоянии ожогового шока// Бюлл. экспер. биологии и медицины, 2002, т.134, © 11, стр.528-531.

4. Владимиров Ю.А. Свободные радикалы в биологических системах//Биология, Соросовский Образовательный журнал, 2000

5. Loguercio C., Federico A. Oxidative stress in viral and alcoholic hepatitis// Free Radic Biol Med. 2003 Jan 1;34 (1): 1-10

6. Никитин Е.В., Сервецкий К.Л., Дорощенко П.В. Клинико-патогенетическое значение состояния перекисного окисления липидов в остром периоде вирусного гепатита В у лиц плавсостава и реко мендации по реабилитации //Вiсник морсько› медицини.-1998.- N1.- С. 15-17.

7. Internotional conference on "Superoxide dismutases: Recent Advanses and Clinical Applications" Маy 14-15, 1998. Institut Pasteur- Paris.- 125 p.

8. Davis JM, Richter SE, Biswas S, Rosenfeld WN, Parton L, Gewolb IH Parad R, Carlo W, Couser RJ, Baumgart S, Atluru V, Salerno L, Kassem N. Long-term follow-up of premature infants treated with prophylactic, intratracheal recombinant human CuZn superoxide dismutase. J Perinatol 2000;4:213-216

9. Скальный А. В., Кудрин А. В. Радиация, микроэлементы, антиоксиданты и

10. иммунитет, М. 2000, с. 427.

11. Клебанов Г. И., Теселкин Ю. О., Бабенкова И., Любицкий О. Б., Владимиров Ю. А. Антиоксидантная активность сыворотки крови //Вестник РАМН. -1999. -© 2. -С. 15-21.

12. Нагоев Б. С., Иванова М. Р. Роль системы антиоксидантной защиты организма в патогенезе острых вирусных гепатитов// Терапевтический архив ©11 2003, Кабардино-Балкарский государственный университет им. Х. М. Бербекова, Нальчик



Страница вверх

Свидетельство о регистрации сетевого электронного научного издания N 077 от 29.11.2006
Журнал основан 16 ноября 2000г.
Выдано Министерством РФ по делам печати, телерадиовещания и средств массовых коммуникаций
(c) Перепечатка материалов сайта Medline.Ru возможна только с письменного разрешения редакции

Размещение рекламы

Rambler's Top100