Опубликовать статью

Информационное партнерство

Инфоресурсы

Контакты

ТОМ 2, СТ. 49 (сc. 223-297) // 28-31 мая 2001 г.,

Юбилейная X Конференция "Нейроиммунология"

---

Ангиогенез является важным компонентом воспалительных реакций и последующих восстановительных процессов. Исследование медиаторов ангиогенеза является актуальным для поиска подходов к лечению заболеваний связанных с нарушением пороцессов кровообращения, в частности таких, как ишемические инсульты. Дефенсины - группа высококатионных низкомолекулярных пептидов (3,5-4,5 кДа), содержащихся в гранулах нейтрофилов. Дефенсины обладают широким спектром антибактериальной активности, а так же участвуют в запуске и развитии процессов воспаления и проявляют иммунорегуляторные свойства. Было показано , что они способны проходить через гематоэнцефалический барьер и оказывать влияние на клетки нервной системы.
Целью настоящего исследования послужило изучение эффекта двух антимикробных пептидов нейтрофильных гранулоцитов млекопитающих на пролиферативную активность и адгезию эндотелиальных клеток к компонентам внеклеточного матрикса. Исследуемые пептиды были получены из нейтрофилов человека (HNP) и кролика (NP-2) методом ультрафильтрации и очищены с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии. Ангиогенные свойства дефенсинов исследовали на эндотелиальных клетках человека линии ECV-304 и EA.hy926, культивируемых в бессывороточной среде. Специфичность полученных эффектов проверяли на линии мышиных фибробластов L-929. Пролиферативную активность клеток оценивали с помощью МТТ-теста; адгезию клеток к пластику, покрытому желатином, определяли спектрофотометрически после окрашивания клеток метиленовым синим.
Полученные результаты выявили однонаправленный эффект действия пептидов. Оба дефенсина стимулировали пролиферативную активность и адгезию эндотелия в концентрациях 0,1-10 мкг/мл, причем этот эффект был выражен сильнее для дефенсина кролика. Указанные концентрации не являются токсичными для клеток и могут быть обнаружены в сыворотке больных (Алешина Г.М. и др.,1998). Подобный эффект препаратов не был специфичен только для эндотелиальных клеточных линий и воспроизводился также на фибробластах. Это подтверждает данные, полученными другими авторами о действии дефенсинов на культивируемые линии клеток фибробластов (Murphy C.J et.al, 1993).
Исследование влияния дефенсинов на функции эндотелиальных клеток in vitro проводилось впервые. Полученные нами данные хорошо согласуются с немногочисленными работами, описывающими проангиогенные характеристики исследуемых препаратов. Было показано, что дефенсины способны связываться с эндотелием сосудов (Higazi et.al., 1996), усиливать проницаемость сосудистой стенки (Ranadive N.S., 1968), а при в/м иньекции крысам было зарегистрировано увеличение количества микрососудов и ускоренное заживление ран (Кудряшев и др., 1989, 1990). Дальнейшие исследования позволят обосновать возможность клинического применения дефенсинов - природных неиммуногенных низкомолекулярных препаратов, обладающих проангиогенными свойствами и способными проникать через гематоинцефалический барьер для лечения церебральных ишемий и развития коллатерального кровообращения в тканях.
Работа поддержана грантами РФФИ ©00-04-49430 и 99-04-49508.